BKS-db是广泛应用的Ⅱ型糖尿病实验动物模型。血糖检测作为糖尿病研究中的基础手段,具有极其重要的意义。然而,在进行BKS-db小鼠的血糖检测时,有许多需要注意的细节,如环境刺激、小鼠状态、测量时间,饱腹程度(禁食时间)等,对于确保实验结果的准确性和可靠性都至关重要。以下五大注意事项,快来看看还有哪些是您不知道的~
第 一滴血中往往含有一定的组织液,会影响血糖的测量结果,使测出的血糖比真实血糖低一些。
小鼠的代谢速率比人类更快,长时间(一般指过夜)禁食,会造成小鼠处于饥饿状态体重迅速降低(过夜禁食后降低可达15%左右,如果实验中涉及对体重的连续评价,慎重使用过夜禁食);另一方面,长时间禁食造成小鼠体内的各类组织中贮存的糖原被耗竭,此状态下更适合研究组织对葡萄糖的摄取能力。因此5-6h的短时晨间禁食可在更接近生理状态下评估胰岛素的相关效应。
血糖检测当天,操作环境务必保持安静,检测前小鼠不要进行任何操作(包括换笼盒),避免小鼠因紧张和活动导致血糖波动。整个检测过程动作需轻柔,注意不要抓着尾部强制固定小鼠在网格上,手部需跟随小鼠一同移动,减少应激。
因为有多尿特征,饲养期间小鼠笼盒较容易潮湿和脏,会对小鼠的健康状况产生影响,建议加大垫料更换频率,一般1~2天更换一次垫料,操作时避免给小鼠压力,减少应激反应。适当降低饲养密度,一般2~3只/笼。
为了保证实验结果的稳定性,同一实验中不同测试点的检测时间段需保持一致,并采用相同的采血方式。不同实验间如需进行数据比较,也需要保证实验间的检测时间段一致。
集萃南宫28ng利用基因编辑技术和胚胎注射技术在BKS-misty突变杂合子背景上构建了Lepr基因突变小鼠,可用于Ⅱ型糖尿病研究。
图1 T056480 BKS-db小鼠血糖水平
测量5-18w小鼠餐后血糖数据,8w、12w、16w时检测小鼠禁食5h后血糖数据。结果显示T056480小鼠血糖水平较对照显著升高。(数据以Mean±SEM展示,G1-G2: n=10, G3-G4: n=20)
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