IL15（白细胞介素-15）是一种由活化的单核－巨噬细胞、表皮细胞和成纤维细胞等多种细胞产生的多效性细胞因子，发挥类似IL2的生物学活性，具有激活T细胞、B细胞和NK细胞的作用，并可介导这些细胞的增殖和存活功能。huHSC-NCG-hIL15能重建有功能性的T细胞和NK细胞，生存周期大于39周，可用于肿瘤免疫治疗药物的研究。

应用领域

1. 用于人源细胞、组织移植；

2. 接种人源肿瘤用于筛选相关药物，特别是基于ADCC作用的药效评价；

3. 用于人类造血系统和免疫系统研究。

实验流程

验证数据

图1. NCG-hIL15小鼠外周血中人源IL15表达水平

NCG-hIL15人源化小鼠的杂合子及纯合子中均能检测到人源IL15的表达，纯合子表达水平高于杂合子。

图2. huHSC-NCG-hIL15重建过程中主要重建T、NK细胞

huHSC-NCG及huHSC-NCG-hIL15小鼠外周血中各免疫细胞的重建水平。于7、9、11、13周收集huHSC-NCG及huHSC-NCG-hIL15小鼠外周血，采用流式细胞技术检测huHSC-NCG小鼠及huHSC-NCG-hIL15小鼠人源化进程。检测指标为hCD45, hCD3, hCD19, hCD4, hCD8, hCD56。随着免疫重建进程，5周左右huHSC- NCG-hIL15小鼠外周血中hCD45+白细胞水平在已达20%以上，其中hCD3+ T细胞水平逐渐增加，且分化出hCD4+及hCD8+ T细胞亚群。与huHSC-NCG小鼠相比，CD56+NK细胞重建水平明显升高。

图3. huHSC-NCG及huHSC-NCG-hIL15小鼠外周血中NK细胞功能基因表达检测

于13周收集huHSC-NCG及huHSC-NCG-hIL15小鼠外周血，采用流式细胞技术检测huHSC-NCG小鼠及huHSC-NCG-hIL15小鼠外周血中重建的人源NK细胞功能基因表达情况。检测指标为CD56、CD16、KIR3DL、NKG2D。与huHSC-NCG相比，huHSC-NCG-hIL15小鼠人源NK细胞重建水平显著升高，且可以表达KIR3DL、NKG2D功能性蛋白。

图4. 基于huHSC-NCG-hIL15的体外药效实验

随着效靶比的增加(NK：K562=2: 1，5: 1，10: 1)，NCG-IL15人源化小鼠重建NK细胞对于人慢性髓系白血病细胞K562的杀伤率也随之增加。随着效靶比的增加(NK：Raji=2: 1，5: 1)，NCG-IL15人源化小鼠重建NK细胞对于Raji细胞的杀伤率也随之增加。加入0 μg/mL及10 μg/mL的Rituximab(靶向CD20抗体，主要通过抗体依赖性细胞介导的细胞毒作用ADCC杀伤CD20+肿瘤细胞)，Rituximab抗体通过NK细胞介导的ADCC作用， 对Raji细胞的杀伤作用进一步增强。

图5. 基于huHSC-NCG-hIL15的体内药效实验

将对数生长期人淋巴瘤细胞Raji细胞接种到huHSC-NCG-hIL15小鼠皮下，待肿瘤生长至平均体积约40-50 mm 3时，随机分为PBS组，Rituximab给药组及Blincyto给药组，并使用相应的药物进行治疗。结果显示： Rituximab组（TGI=48.95%）及Blincyto组（TGI=59.67%）对huHSC-NCG-hIL15的Raji细胞荷瘤鼠上肿瘤生长有抑制作用。